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纳豆激酶生产厂家分享纳豆激酶三大检测法

来源:http://www.zhenfujiayuan.com/news/180.html发布时间:2018-06-21

纳豆激酶生产厂家分享纳豆激酶三大检测法

纳豆激酶生产厂家分享目前行业内流行的纳豆激酶检测大致有三种方法,其原理、利弊简介如下:

IU维蛋白平板法:

以尿激酶为对照,与纳豆激酶样品同时在纤维蛋白平板特定条件下所形成水解圈,测量各自水解圈直径,通过计算取得相应纳豆激酶活力。由于对水解圈直径的认定的认定存在经验人员视觉差异,导致测定粗放,数据波动性强,重复性差,不具权威依据。

FU紫外分光法

纳豆激酶与纤维蛋白在一定条件下作用会产生可溶性低分子物质,通过紫外分光技术检测其浓度,通过计算取得相应纳豆激酶活力,数据稳定,重复性强。测定硬件条件苛刻,测定成本高,不具权威性依据。

U中性蛋白酶法

纳豆激酶生产厂家分享纳豆激酶与酪蛋白在一定条件下作用会产生可溶性低分子物质,通过普通比色计检测其浓度,计算取得相应纳豆激酶活力,数据稳定,重复性强。测定简单,检测成本低,有国家标准为依据。

1)琼脂糖一纤维蛋白平板法是,是目前最常用的纤溶酶溶栓活力测定方法,纳豆激酶生产厂家分享此法的原理是用琼脂糖作为固体支持,以凝血酶和纤维蛋白原制做人工血栓平板,注入NK,用溶解圈垂直直径的乘积(mm2)表示纤溶活力,以标准UK或纤溶酶为标准品作标准曲线,计算出NK的活性相当于标准品的单位数。此法简便易行,并可同时测定多个样品,但由于溶解圈面积受恒温反应时间的影响很大,所以对恒温时间的控制十分重要,且恒温时间对粗制酶活性测定的影响比对歴精制产品活性测定的影响大。

2)在直径15mn的硅化试管中依次加入pH值为7.7的咪唑缓冲液、纳豆激酶收集液、凝血酶和纤维蛋白原,立即振摇数秒,使之产生絮状物,置38℃水浴30min置冰水中终止反应。纳豆激酶生产厂家认为用100目尼龙网过滤试管中未溶解的纤维蛋白,滤纸吸干,用蒸馏水漂洗,再用滤纸吸干,放入小试管中,再加3mL浓度为0.2mol/L的NaOH溶液,在沸水中煮15min,冷却。用分光光度计测定溶液在280nm处的吸光值,并根据活力计算公式计算纤溶活力。

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